詳細介紹
QIAGEN試劑盒 QIAGEN代理商,凱杰一級代理
原理
為獲得準確的real-time RT-PCR基因表達分析結果,很重要的是僅擴增和檢測cDNA。基因組DNA的干擾可通過設計橫跨外顯子/外顯子邊界的引物或探針避免。盡管如此,在某些特殊情況下(如:cDNA來自一個單外顯子基因),起始RNA樣品必須無基因組DNA。
使用QuantiTect Reverse Transcription Kit,基因組DNA污染物可使用*的gDNA去除緩沖液迅速有效的去除。因為純化RNA樣品后無需另外采用DNA酶消化,從而可節省時間和費用。并且也無需設計RNA特異性引物和探針。
應用
QuantiTect Reverse Transcription Kit可從各種類型的起始樣品中合成cDNA以實現高效和高靈敏度的real-time RT-PCR,包括激光顯微切割樣品和活組織切片樣品。與其他供應商提供的試劑相比,QuantiTect Reverse Transcription Kit在檢測低豐度基因時具有更高的靈敏度(見圖:“Real-Time,兩步法RT-PCR精確度更高”)。
為獲得高特異性和高靈敏度的real-time RT-PCR結果,又避免耗時的反應步驟優化過程,我們推薦QuantiTect Reverse Transcription Kit和其他QuantiTect產品聯合使用。包括經優化的PCR反應預混液和即用型引物,使用SYBR Green染料法或序列特異性探針法進行 real-time RT-PCR。